Из чего делают инсулин? Из чего делают инсулин для диабетиков Получение инсулина в промышленности.

Инсулинявляется регулятором углеводного обмена. В организме человека инсулин синтезируется в бетаклетках островков Лангерганса поджелудочной железы. При отсутствии или недостатке его синтеза развивается такое заболевание как сахарный диабет (инсулинозависимый диабет – 1 типа). При сахарном диабете повышается содержание глюкозы в крови и развиваются патологические процессы. Диабет II типа (инсулинозависимый) возникает при дефектах в структуре рецепторов, отвечающих за проникновение глюкозы в клетку. Все эти сведения касаются этиологии такого заболевания как сахарный диабет.

Инсулин это пептидный гормон, состоящий из двух пептидных цепей: А-цепь состоит из 21 аминокислотных остатков. В-цепь состоит из 30 аминокислотных остатков. Эти две цепи связаны бисульфидными SS связями, которые обеспечивают пространственную структуру белка инсулина. При синтезе инсулина в поджелудочной железе вначале образуется предшественник инсулина, так называемый проинсулин. Этот проинсулин состоит из А-цепи, В-цепи и С-пептида, состоящего из 35 аминокислотных остатков. С-пептид отщепляется под действием карбоксипептидазы и трипсина и проинсулин переходит в активный инсулин.

Есть разные способы получения инсулина. Мы остановимся на получении инсулина биосинтетическим путем, с точки зрения преимущества этого метода.

До получения рекомбинантного инсулина препарат получали из поджелудочной железы свиней и крупного рогатого скота. Однако такой способ получения инсулина имел целый ряд недостатков:

− недостаток поголовья скота;

− сложности хранения и транспортировки сырья;

− трудности выделения и очистки гормона;

− возможность развития аллергических реакций.

Такой инсулин, как чужеродный белок, также может и инактивироваться в крови образующимися антителами. Кроме того, для получения 1 килограмма инсулина требуется 35 тысяч голов свиней (если известно, что годовая потребность в инсулине -1 тонна препарата). С другой стороны, биосинтетическим путем можно получить такое же количесвто инсулина, проведя биосинтез в 25 кубовом ферментере, используя рекомбинантный микроорганизм Escherichia coli. Биосинтетический метод получения инсулина стал применяться в начале 80-х годов.

В настоящее время инсулин человека, в основном, получают двумя способами:

1) модификацией свиного инсулина синтетико-ферментативным методом;

Метод основан на том, что свиной инсулин отличается от инсулина человека одной заменой на С-конце В-цепи Ala30Thr. Замену аланина на треонин осуществляют путем катализируемого ферментом отщепления аланина и присоединение вместо него защищенного по карбоксильной группе остатка треонина, присутствующего в реакционной смеси в большом избытке. После отщепления защитной О-трет-бутильной группы получают инсулин человека.

2) генно-инженерным способом;

Существует два основных подхода для получения генно-инженерного инсулина человека.

В первом случае (2.1) осуществляют раздельное (разные штаммы-продуценты) получение обеих цепей с последующим фолдингом молекулы (образование дисульфидных мостиков) и разделением изоформ.

Во втором (2.2) - получение в виде предшественника (проинсулина) с последующим ферментативным расщеплением трипсином и карбоксипептидазой В до активной формы гормона.

Наиболее предпочтительным в настоящее время является получение инсулина в виде предшественника, обеспечивающее правильность замыкания дисульфидных мостиков (в случае раздельного получения цепей проводят последовательные циклы денатурации, разделения изоформ и ренатурации).

Метод 2.1. Раздельный синтез А- и В-цепей с последующим заключением между ними дисульфидных связей

1. Путем химического синтеза создаются последовательности нуклеотидов, которые кодируют образование А и В цепей (создание синтетических генов).

2. Каждый из синтетических генов вводят в плазмиды (в одну плазмиду вводят ген, синтезирующий цепь А, в другую плазмиду вводят ген, синтезирующий цепь В).

3. Вводят ген, кодирующий образование фермента бетагалактозидазы. Этот ген включают в каждую плазмиду для того, чтобы добиться активной репликации плазмид.

4. Плазмиды вводят в клетку E. coli- кишечной палочки и получают две культуры продуцента, одна культура синтезирует А-цепь, вторая В-цепь.

5. Помещают две культуры в ферментер. В среду добавляют галактозу, которая индуцирует образование фермента бетагалактозидазы. При этом плазмиды активно реплицируются, образуя много копий плазмид и, следовательно, много генов, синтезирующих Аи В цепи.

6. Клетки лизируют, выделяют А и В цепи, которые связаны с бетагалактозидазой. Все это обрабатывают бромцианом и отщепляют А и В-цепи от бетагалактозидазы. Затем производят дальнейшую очистку и выделение А и В цепей.

7. Окисляют остатки цистеина, связывают и получают инсулин.

Недостатки подобного метода: надо получать два отдельных штамма-продуцента, проводить две ферментации, две процедуры выделения и очистки, а самое главное, трудно обеспечить правильное замыкание дисульфидных связей, то есть получить активный инсулин.

Метод 2.2. Синтез проинсулина с последующим выщеплением С- пептида.

При этом конформация проинсулина обеспечивает правильное замыкание дисульфидных связей, что делает второй способ микробиологического синтеза более перспективным.

В Институте биоорганической химии РАН получен рекомбинантный инсулин (инсуран) с использованием генно-инженерных штаммов E.coli. Из выращенной биомассы выделяется предшественник, гибридный белок, экспрессируемый в количестве 40% от всего клеточного белка, содержащий препроинсулин. Превращение его в инсулин in vitro осуществляется в той же последовательности, что и in vivо – отщепляется лидирующий полипептид, препроинсулин превращается в инсулин через стадии окислительного сульфитолиза с последующим восстановительным замыканием трех дисульфидных связей и ферментативным вычленением связывающего С-пептида. После ряда хромотографических очисток, включающих ионообменные, гелевые и ВЭЖХ, получают человеческий инсулин высокой чистоты и природной активности.

В отличие от инсулина аминокислотная последовательность с-пептида сильно отличается у разных видов млекопитающих, что делает невозможным получение его из животного сырья. Существующие способы получения с-пептида, можно разделить на три категории:

1) Получение с-пептида химическим синтезом. Этим способом получено большинство препарата, представленного на рынке в настоящее время.

2) Получение с-пептида биосинтетическими методами в составе слитых белков. Для получения с-пептида этим способом создается химерный белок, в котором за лидерным фрагментом следуют несколько последовательностей с-пептида, разделенных аминокислотами, обеспечивающих гидролиз специфическими протеазами. На первом этапе происходит культивирование микроорганизмов в ферментерах, затем в них индуцируется синтез рекомбинантного полипептида; клетки разрушаются, и рекомбинантный белок очищается и обрабатывается специфическими протеазами, приводящими к получению с-пептида. На заключительном этапе происходит очистка с-пептида от примесей. Данный способ может обеспечить большие объемы производства, но требует создания штаммов-продуцентов, отработки условий культивирования микроорганизмов, способов очистки рекомбинантного белка, а также создания и валидации методов контроля качества.

3) Получение с-пептида биосинтетическими методами совместно с инсулином. Этот способ производства заключается во введении некоторых модификаций в технологию получения рекомбинантного инсулина с целью оптимизации получения с-пептида, образующегося на определенных этапах производства, в основе которого лежит получение проинсулина, не подвергающегося модификациям. Данный способ имеет ряд преимуществ. Для получения с-пептида этим способом не требуется создания новых штаммов-продуцентов, отработки технологии очистки и сворачивания белка, создания новых инструментальных методов контроля производственного процесса.

Инсулинозависимый диабет – это заболевание, которое требует пожизненной терапии. От наличия или отсутствия инсулина в прямом смысле слова зависит жизнь пациента.
Диабет официально признан неинфекционной эпидемией и по данным ВОЗ занимает по темпам распространения третье место после сердечнососудистых и онкологических заболеваний. В мире насчитывается 200 млн больных диабетом, что составляет уже 6% взрослого населения мира. Более 2,7 млн из них проживают в нашей стране. Во много их жизнь зависит от того, что производится в этих стенах.

Завод «Медсинтез» работает в свердловском Новоуральске с 2003 года. Сегодня он удовлетворяет 70% потребности всего российского рынка инсулина. Так что я с удовольствием и интересом воспользовался возможностью совершит небольшую экскурсию по этому предприятию.
И первое, что меня удивило, так это здания-«матрешки». Внутри производственного «нестерильного» цеха находиться еще один — «чистый». Конечно и в общих коридорах везде зеркальные полы и чистота. Но основное действо разворачивается там, за стеклянными окошками.

ООО «Завод Медсинтез», созданное в 2003 г., входит в НП «Уральский фармацевтический кластер». Сегодня кластер объединяет 29 фирм различного профиля с общей численностью персонала более 1 000 человек. На заводе в настоящее время работает более 300 человек.

Гостям внутрь вход заказан, хоть мы и были упакованы в спецодежду. Приходилось глазеть через окна.

Внутри главенствует женский ручной труд. Что-то раскладывают и упаковывают.

И хоть осознаешь, что там внутри все безопасно и производятся лекарства, все равно как-то не по себе.

Так чем же заняты на работе эти прекрасные глаза напротив?
Если в двух словах, вернее в одной картинке, то вот:

СХЕМА ПРОИЗВОДСТВА ИНСУЛИНА

А теперь по существу. В 2008 г. на заводе «Медсинтез» при участии губернатора Свердловской области Э.Э. Росселя состоялось открытие первого в России промышленного производства готовых лекарственных форм генно-инженерного инсулина человека в соответствии с требованиям GMP EC (сертификат TUV NORD № 04100 050254/01).
Мощность производственного участка составляет до 10 млрд. МЕ в год, что позволяет удовлетворить до 70% потребности российского рынка инсулинов.

Производство располагается в новом здании площадью более 4000 м². Имеет в своем составе комплекс чистых помещений площадью 386 м², включающий помещения классов чистоты А, В, С и Д.
На производстве смонтировано технологическое оборудование ведущих мировых производителей: BOSCH (Германия), SUDMO (Германия), GF (Италия), EISAI (Япония).

Однако субстанцию, которая необходима для производства препарата, ранее приходилось приобретать во Франции. Чтобы самим выпускать субстанцию, нужно было разработать собственную бактерию. На это у уральских ученых ушло четыре года - свой штамм они запатентовали в мае 2012-го. Теперь дело за тем, чтобы развернуть производство.А пока нам показали святая-святых — вот с этой субстанции и начинается производственная цепочка.

Уральский полпред Игорь Холманских и сопровождающие лица слушают краткое описание рабочего процесса.

По ту сторону стекла находятся биореакторы. Все автоматизировано и люди находятся только по эту сторону.

«Живых» сотрудников можно увидеть только дальше по технологической цепочке. Цех подготовки воды.

Сами препараты перемещаются из цеха в цех исключительно на конвейерах.

Вот девушки собирают упаковки и складывают их на транспортную ленту.

Транспортер подходит к границе «стерильной» зоны с сбрасывает упаковки в специальный лоток.

Вместе с упаковками из лотка выбивается мощный поток воздуха. Бактериям и прочей гадости «против шерсти» не пробраться.

Там их раскладывают на паллеты и отправляют в этот здоровенный очиститель.

Тоже безлюдно, вернее трудится всего один оператор. Тележки катаются автоматически по рельсам.

Теперь последний участок — фасовка в транспортную тару. Инсулин готов отправиться к потребителю. Народу тоже не много, даже коробки раскладывает жуткая машина на сервоприводах.

В Новоуральске строится новый корпус, который должен полностью покрыть потребность в субстанции инсулина для всей страны. Более того, часть продукции будет поставляться за рубеж - соглашения об этом уже подписаны.

Новый корпус вступит в строй через несколько месяцев. Первую партию полностью российского инсулина на «Медсинтезе» рассчитывают получить уже в первом полугодии 2013 года.
Стоимость проекта строительства нового корпуса - 2,6 млрд рублей. Площадь цеха 15 тыс. кв. м, из них 2 тыс. - лаборатории. Большая часть оборудования будет закуплена в Германии. Мощность завода должна составить 400 кг субстанции в год. Это, по оценкам экспертов, на 75 кг превышает потребность Российской Федерации.

На сегодняшний день около 2 млн россиян нуждаются в ежедневном приеме инсулина. Упаковка зарубежного препарата стоит около 600 рублей, отечественного - около 450–500 рублей. После реализации проекта стоимость должна снизиться до 300 рублей. Экономия российского бюджета при этом может составить примерно 4 млрд рублей.

Сегодня различные виды иммунотерапии используются:

• для лечения инсулинозависимых пациентов (сахарный диабет I типа);
• в качестве временной, предоперационной терапии для больных с диабетом II типа;
• для больных-диабетиков с заболеванием II типа, при острых респираторных и других инфекционных заболеваниях;
• инсулин при диабете II типа требуется колоть, в случае низкой эффективности или непереносимости пациентом других фармакологических средств, снижающих процентное содержание глюкозидов в крови.

Сегодня во врачебной практике в основном используются три метода инсулинотерапии:

Интенсифицированный метод инсулинотерапии

Современные методы интенсифицированной инсулинотерапии имитируют естественное, физиологическое выделение поджелудочной железой гормона – инсулина. Его прописывают при отсутствии у пациента избыточного веса и, когда не имеет места вероятность психоэмоциональных перегрузок, из суточного расчета - 0,5-1,0 МЕ (международных единиц действия) гормона на 1 килограмм массы тела. При этом должны выполняться следующие требования:

• препарат необходимо колоть в дозах, достаточных для полной нейтрализации избыточного содержания сахаридов в крови;
• введенный извне инсулин при сахарном диабете должен достаточно полно имитировать базальную секрецию гормона, выделяемого островками Лангерганса, которая имеет пиковое значение после приёма пищи.

Их этих принципов складывается интенсифицированная методика, когда суточную, физиологически необходимую дозу делят на более мелкие инъекции, дифференцируя инсулины по степени их временной эффективности – краткосрочного или пролонгированного действия. Последний вид инсулинов необходимо колоть на ночь и утром, сразу после пробуждения, что достаточно точно и полно имитирует естественное функционирование поджелудочной железы.

Инъекции инсулином с коротким сроком действия назначают после приема пищи, с высокой концентрацией углеводов. Как правило, разовая инъекция рассчитывается индивидуально по числу условных хлебных единиц, которым эквивалентен прием пищи.

Традиционная инсулинотерапия

Традиционной (стандартной) инсулинотерапией называют метод лечения больных сахарным диабетом, когда в одной инъекции смешаны инсулины краткосрочного и пролонгированного действия. Достоинством этого способа введения лекарственного препарата считается минимизация числа уколов – обычно требуется колоть инсулин 1-3 раза в день. Основным недостатком этого вида лечения считается отсутствие стопроцентной имитации физиологического выделения гормона поджелудочной железой, что делает невозможным полноценную компенсацию дефектов углеводного метаболизма.

Стандартную схему использования традиционной инсулинотерапии можно представить в следующем виде:

1. Суточная потребность организма в инсулине вводится больному в виде 1-3 инъекций в сутки:
2. В одной инъекции содержатся инсулины среднего и краткосрочного срока действия: доля короткодействующих инсулинов составляет 1/3 об общего количества препарата;

на инсулин среднего срока действия приходится 2/3 общего объема инъекции.

Помповая инсулинотерапия

Помповой инсулинотерапией называется метод введения препарата в организм, когда традиционный шприц не требуется, а подкожные инъекции осуществляются специальным электронным устройством – инсулиновой помпой, которая способна колоть инсулины ультракороткого и короткого срока действия в виде микродоз. Инсулиновая помпа достаточно точно имитирует естественное поступление гормона в организм, для чего в ней предусмотрены два режима работы.

• режим базального введения, когда микродозы инсулина поступают в организм непрерывно в виде микродоз;
• болюсный режим, при котором периодичность и дозировка введения препарата программируются больным.

Первый режим позволяет создать инсулиногормональный фон, наиболее приближенный к естественной секреции гормона поджелудочной железой, что дает возможность не колоть инсулины пролонгированного действия.

Второй режим обычно применяется непосредственно перед едой, что дает возможность:

• снизить вероятность повышения гликемического индекса до критического уровня;
• позволяет отказаться от использования препаратов с ультракоротким сроком действия.

При совмещении обоих режимов максимально точно имитируется естественное физиологическое выделение инсулина в организме человека. При использовании инсулиновой помпы больной должен знать основные правила использования этого устройства, для чего необходимо проконсультироваться с лечащим врачом. Кроме того, он должен помнить, когда необходимо менять катетер, через который происходят подкожные впрыскивания инсулина.

Инсулинотерапия при наличии диабета I типа

Инсулинозависимым больным (сахарный диабет I типа) назначают для полной замены естественной секреции инсулина. Наиболее распространена следующая схема введения препарата в виде инъекций, когда необходимо колоть:

• базальный инсулин (среднего и пролонгированного действия) – один-два раза в сутки;
• болюсный (краткосрочный) – непосредственно перед приемом пищи.

В качестве информации для диабетиков, (но ни в коем случае не как рекомендацию), можно привести некоторые фармацевтические, брендовые названия различных препаратов, снижающих уровень крови в крови:

Базальные инсулины:

• пролонгированного срока действия, «Лантус» («Lantus» - Германия), «Левемир ФлексПен» («Levemir FlexPen» - Дания) и Ультратард ХМ (Ultratard HM - Дания);
• среднего срока действия «Хумулин НПХ» («Humulin NPH» - Швейцария), «Инсуман Базал ГТ» («Insuman Basal GT - Германия») и «Протафан HM» («Protaphane HM - Дания»).

Болюсные препараты:

• инсулины короткого срока действия «Актрапид HM Пенфилл» («Actrapid HM Penfill» – Дания);
• ультракороткого срока действия «НовоРапид» («NovoRapid» - Дания), «Хумалог» («Humalog» - Франция), «Апидра» («Apidra» - Франция).

Комбинация болюсного и базального режимов инъекций называется многократным режимом и является одним из подвидов интенсифицированной терапии. Дозировка каждой инъекции определяется врачам на основе проведенных анализов и общего физического состояния больного. Правильно подобранные комбинации и дозы отдельных инсулинов делают организм человека менее критичным к качеству принимаемой пищи. Обычно доля инсулинов длительного и среднего срока действий составляет 30,0%-50,0% от общей дозы вводимого препарата. Болюсный инулин требует индивидуального подбора дозы для каждого пациента.

Методы инсулинотерапии для больных II типом диабета

Обычно инсулинотерапия при сахарном диабете II типа начинается с постепенного добавления препаратов снижающих уровень сахаридов в крови к обычным лекарственным средам, назначаемых при медикаментозной терапии больных. Для лечения назначают препараты, действующим веществом которого является инсулин гларгин («Лантус» или «Левемир»). При этом колоть раствор для инжекций желательно в одно и то же время. Максимальная суточная дозировка, в зависимости от хода течения и степени запущенности болезни, может достигать 10,0 МЕ.

Если улучшения состояния больного не отмечается и диабет прогрессирует, а медикаментозная терапия по схеме «оральные сахаропонижающие препараты + инъекции бальзового инсулина» не дает нужного эффекта, переходят к терапии, лечение которой основано на инъекционном применении инсулиносодержащих препаратов. Сегодня наиболее распространен интенсифицированный режим, при котором препараты необходимо колоть 2-3 раза в день. Для наиболее комфортного состояния, больные предпочитают минимизировать число инъекций. С точки терапевтического эффекта простота режима должна обеспечивать максимальную эффективность сахаропонижающие препаратов. Оценка эффективности проводится после проведения инъекций в течение нескольких дней. При этом совмещение утренней и верней дозы нежелательно.

Особенности инсулинотерапии для детей и беременных

Беременным женщинам, кормящим матерям и детям до 12 лет, у которых диагностирован сахарный диабет II типа, инсулинотерапию назначают с некоторыми ограничениями.

Детям инсулин колют с учетом следующих требований:

• для уменьшения суточного количества инъекций назначают комбинированные инъекции, в которых индивидуально подбирается соотношение между препаратами с коротким и средним сроком действия;
• интенсифицированную терапию рекомендуют назначать по достижении двенадцатилетнего возраста;
• при поэтапной корректировке дозировки преподала диапазон изменения между предыдущей и последующей инъекциями ложен лежать в диапазоне 1,0…2,0 МЕ.

При проведении курса инсулинотерапии терапии беременным женщинам, необходимо придерживаться следующих правил:

• инъекции препаратов назначать утром, до завтрака уровень глюкозы должен находится в диапазоне – 3,3-5,6 миллимоль/литр;
• после приема пищи молярность глюкозы в крови должна лежать в пределах 5,6-7,2 миллимоль/литр;
• для предотвращения утренней и послеобеденной гипергликемии при диабете I и II типа требуется минимум две инъекции;
• перед первым и последним приемом пищи инъекции проводятся с использованием инсулинов короткого и среднего периода действия;
• для исключения ночной и «предрассветной» гипергликемии допускает инъекцию сахароснижающего препарата перед ужином, колоть непосредственно перед сном.

Технологии получения фармакологического инсулина

Вопрос об источниках и способах получения инсулина волнует не только специалистов, но и большинство больных. От технологии производства этого гормона зависит эффективность действия препаратов понижающих уровень сахаридов в крови и возможные побочные эффекты от их приема.

Сегодня в фармацевтических средствах, предназначенных для лечения диабета путем понижения уровня глюкозы в организме, используют инсулин, полученный следующими способами:

• получение препаратов животного происхождения предусматривает использование животного сырья (бычий или свиной инсулин);
• биосинтетический способ использует животное сырье, при модифицированном способе очистки;
• рекомбинантным или модифицированным генно-инженерным способом;
• синтетическим способом.

Наиболее перспективен генно-инженерный способ получения, при котором обеспечивается наивысшая степень очистки и может быть достигнуто практически полное отсутствие проинсулина. Препараты на его основе не вызывают аллергических реакций и имеют достаточный узкий круг противопоказаний.

Возможные негативные последствия инсулинотерапии

При достаточной безопасности и хорошей переносимости больными инсулина, полученного генно-инженерными способами, возможны отдельные негативные последствия, основными из которых являются:

• появления аллергических раздражений, локализованных в месте инъекции, связанных с неправильным иглоукалыванием или введением слишком холодного препарата;
• деградация подкожного слоя жировой клетчатки в зонах инъекций;
• развитие гипогликемии, приводящее к интенсификации потоотделения, постоянному чувству голода, учащению сердечного ритма.

Для снижения вероятности возникновения этих явлений при проведении инсулинотерапии следует строго выполнять все предписания врача.

Из чего производят инсулин

Инсулин – это основное лекарство для лечения больных сахарным диабетом 1 типа. Иногда он также используется для стабилизации состояния пациента и улучшения его самочувствия при втором типе заболевания. Это вещество по своей природе является гормоном, который способен в малых дозах влиять на обмен углеводов. В норме поджелудочная железа вырабатывает достаточное количество инсулина, который помогает поддерживать физиологический уровень сахара в крови. Но при серьезных эндокринных нарушениях единственным шансом помочь больному часто становятся именно инъекции инсулина. Принимать его перорально (в виде таблеток), к сожалению, нельзя, поскольку он полностью разрушается в пищеварительном тракте и утрачивает биологическую ценность.

Варианты получения инсулина для использования в медицинской практике

Многие диабетики наверняка хоть раз задавались вопросом, из чего делают инсулин, который применяется в медицинских целях? В настоящее время чаще всего это лекарство получают с помощью методов генной инженерии и биотехнологии, но иногда его извлекают из сырья животного происхождения.

Препараты, получаемые из сырья животного происхождения

Получение этого гормона из поджелудочной железы свиней и крупного рогатого скота – старая технология, которая сегодня используется довольно редко. Это связано с невысоким качеством получаемого лекарства, его склонностью вызывать аллергические реакции и недостаточной степенью очистки. Дело в том, что, поскольку гормон – это белковое вещество, оно состоит из определенного набора аминокислот.

В начале и середине 20 столетия, когда аналогичных препаратов не существовало, даже такой инсулин стал прорывом в медицине и позволил вывести лечение диабетиков на новый уровень. Гормоны, полученные таким методом, снижали сахар крови, правда, при этом они часто вызывали побочные эффекты и аллергию. Отличия в составе аминокислот и примеси в лекарстве сказывались на состоянии пациентов, особенно это проявлялось у более уязвимых категорий больных (детей и пожилых людей). Еще одна причина плохой переносимости такого инсулина – наличие его неактивного предшественника в лекарстве (проинсулина), избавиться от которого в данной вариации лекарства было невозможно.

В наше время существуют усовершенствованные свиные инсулины, которые лишены этих недостатков. Их получают из поджелудочной железы свиньи, но после этого поддают дополнительной обработке и очистке. Они являются многокомпонентными и содержат в своем составе вспомогательные вещества.

Модифицированный свиной инсулин практически ничем не отличается от человеческого гормона, поэтому его до сих пор используют на практике

Такие лекарства переносятся пациентами гораздо лучше и практически не вызывают побочных реакций, они не угнетают иммунитет и эффективно снижают сахар в крови. Бычий инсулин на сегодняшний день в медицине не используется, так как из-за своей чужеродной структуры он отрицательно влияет на иммунную и другие системы организма человека.

Генноинженерный инсулин

Человеческий инсулин, который применяется для диабетиков, в промышленном масштабе получают двумя способами:

• с помощью ферментативной обработки свиного инсулина;
• с использованием генномодифицированных штаммов кишечной палочки или дрожжей.

При физико-химическом изменении молекулы свиного инсулина под действием специальных ферментов становятся идентичными инсулину человека. Аминокислотный состав полученного препарата ничем не отличается от состава натурального гормона, который вырабатывается в организме людей. В процессе производства лекарство проходит высокую очистку, поэтому не вызывает аллергических реакций и других нежелательных проявлений.

Но чаще всего инсулин получают с помощью модифицированных (генетически измененных) микроорганизмов. Бактерии или дрожжи с помощью биотехнологических методов изменены таким образом, что могут сами производить инсулин.

Существует 2 методики подобного получения инсулина. Первая из них основана на использовании двух разных штаммов (видов) какого-то одного микроорганизма. Каждый из них синтезирует только одну цепь молекулы ДНК гормона (всего их две, и они спирально закручены между собой). Затем эти цепи соединяются, и в полученном растворе уже можно отделить активные формы инсулина от тех, которые не несут никакого биологического значения.

Второй способ получения лекарства с помощью кишечной палочки или дрожжей основан на том, что микроб сначала производит неактивный инсулин (то есть его предшественник – проинсулин). Потом с помощью ферментативной обработки эту форму активируют и используют в медицине.

Персонал, который имеет доступ в определенные производственные помещения, всегда должен быть одет в стерильный защитный костюм, благодаря чему контакт препарата с биологическими жидкостями человека исключается

Все эти процессы обычно автоматизированы, воздух и все соприкасающиеся поверхности с ампулами и флаконами стерильны, а линии с оборудованием герметично закрыты.

Методы биотехнологии дают возможность ученым думать об альтернативных решениях проблемы сахарного диабета. Например, на сегодняшний день проводятся доклинические исследования производства искусственных бета-клеток поджелудочной железы, которые могут быть получены с помощью методов генной инженерии. Возможно, в будущем их будут использовать для улучшения функционирования этого органа у больного человека.

Производство современных препаратов инсулина – сложный технологический процесс, который предусматривает автоматизацию и минимальное вмешательство человека

Дополнительные компоненты

Производство инсулина без вспомогательных веществ в современном мире практически невозможно представить, ведь они позволяют улучшить его химические свойства, продлить время действия и достичь высокой степени чистоты.

По своим свойствам все дополнительные ингредиенты можно разделить на такие классы:

• пролонгаторы (вещества, которые используются для обеспечения более длительного действия лекарства);
• дезинфицирующие компоненты;
• стабилизаторы, благодаря которым в растворе лекарства поддерживается оптимальная кислотность.

Пролонгирующие добавки

Существуют инсулины продленного действия, биологическая активность которых продолжается в течение 8 – 42 часов (в зависимости от группы препарата). Такой эффект достигается, благодаря добавлению в инъекционный раствор специальных веществ – пролонгаторов. Чаще всего с этой целью применяется одно из таких соединений:

Белки, которые продлевают действие лекарства, проходят детальную очистку и являются низкоаллергенными (например, протамин). Соли цинка также не оказывают отрицательного влияния ни на активность инсулина, ни на самочувствие человека.

Антимикробные составляющие

Дезинфекторы в составе инсулина необходимы для того, чтобы при хранении и использовании в нем не размножалась микробная флора. Эти вещества являются консервантами и обеспечивают сохранность биологической активности лекарства. К тому же, если пациент вводит гормон из одного флакона только самому себе, то лекарства ему может хватить на несколько дней. За счет качественных антибактериальных компонентов у него не будет потребности выбрасывать неиспользованный препарат из-за теоретической возможности размножения в растворе микробов.

В качестве дезинфицирующих составляющих при производстве инсулина могут использоваться такие вещества:

Если в растворе содержатся ионы цинка, они также выступают дополнительным консервантом из-за своих антимикробных свойств

Для производства каждого вида инсулина подходят определенные дезинфицирующие компоненты. Их взаимодействие с гормоном обязательно исследуют на этапе доклинических испытаний, поскольку консервант не должен нарушать биологическую активность инсулина или как-то по-другому отрицательно влиять на его свойства.

Использование консервантов в большинстве случаев позволяет вводить гормон под кожу без ее предварительной обработки спиртом или другими антисептиками (производитель обычно упоминает об этом в инструкции). Это упрощает введение лекарства и сокращает количество подготовительных манипуляций перед самой инъекцией. Но данная рекомендация работает только в случае введения раствора с помощью индивидуального инсулинового шприца с тонкой иглой.

Стабилизаторы

Стабилизаторы необходимы для того, чтобы pH раствора поддерживался на заданном уровне. От уровня кислотности зависит сохранность лекарства, его активность и стабильность химических свойств. При производстве инъекционного гормона для больных диабетом с этой целью обычно используют фосфаты.

Для инсулинов с цинком стабилизаторы растворов нужны не всегда, поскольку ионы металла помогают поддерживать необходимый баланс. Если же они все-таки применяются, то вместо фосфатов используют другие химические соединения, так как комбинация этих веществ приводит к выпадению осадка и непригодности лекарства. Важное свойство, предъявляемое ко всем стабилизаторам – безопасность и отсутствие возможности вступать в любые реакции с инсулином.

Подбором инъекционных лекарств при диабете для каждого конкретного пациента должен заниматься компетентный эндокринолог. Задача инсулина – не только удерживать нормальный уровень сахара в крови, но и не вредить другим органам и системам. Препарат должен быть нейтральным в химическом плане, низкоаллергенным и желательно доступным по цене. Довольно удобно также, если подобранный инсулин можно будет смешивать с другими его версиями по длительности действия.

Комментарии

Копирование материалов с сайта возможно только с указанием ссылки на наш сайт.

ВНИМАНИЕ! Вся информация на сайте является популярно-ознакомительной и не претендует на абсолютную точность с медицинской точки зрения. Лечение обязательно должно проводиться квалифицированным врачом. Занимаясь самолечением вы можете навредить себе!

Из чего делают инсулин: современные наработки для решения нужд диабетиков

Инсулин – гормон поджелудочной железы, играющий важнейшую роль в организме. Именно это вещество способствует адекватному усвоению глюкозы, которая в свою очередь является основным источником энергии, а также питает ткани мозга.

Диабетики, которые вынуждены принимать гормон в виде инъекции, рано или поздно задумываются о том, из чего же делают инсулин, чем отличается один препарат от другого и каким образом искусственные аналоги гормона влияют на самочувствие человека и функциональный потенциал органов и систем.

Отличия разных видов инсулина

Инсулин - жизненно важный препарат. Люди, страдающие сахарным диабетом, не могут обойтись без этого средства. Фармакологический ряд медикаментов для диабетиков относительно широк.

Препараты отличаются друг от друга во многих аспектах:

1. Степень очистки;
2. Источник (производство инсулина предполагает использование человеческого ресурса и животных);
3. Наличие вспомогательных компонентов;
4. Концентрация действующего вещества;
5. РН раствора;
6. Потенциальная возможность комбинировать сразу несколько препаратов. Особо проблематично сочетать в одних терапевтических схемах инсулин короткого и длительного действия.

В мире каждый год передовые фармацевтические компании вырабатывают колоссальное количество «искусственного» гормона. Производители инсулина в России также внесли свой вклад в развитие данной отрасли.

Источники для получения гормона

Из чего делают инсулин для диабетиков, знает далеко не каждый человек, а ведь происхождение этого ценнейшего препарата действительно интересно.

Современная технология производства инсулина использует два источника:

• Животные. Препарат получают, обрабатывая поджелудочные железы крупного рогатого скота (реже), а также свиней. Бычий инсулин содержит в себе целых три «лишних» аминокислоты, которые являются чужеродными по своей биологической структуре и происхождению человеку. Это может стать причиной развития аллергических реакций стойкого характера. Свиной инсулин отличим от человеческого гормона только на одну аминокислоту, что делает его гораздо безопаснее. В зависимости от того, как производят инсулин, насколько тщательно произведут очистку биологического продукта, будет зависеть степень восприятия лекарства организмом человека;
• Человеческие аналоги. Продукты данной категории производятся по сложнейшим технологиям. Передовые фармацевтические компании наладили производство бактериями человеческого инсулина в лечебных целях. Широко распространены методики ферментативной трансформации для получения полусинтетических гормональных продуктов. Еще одна технология предполагает использование инновационных техник в сфере генной инженерии для получения уникальных ДНК-рекомбинантных составов с инсулином.

Как получали инсулин: первые попытки фармацевтов

Препараты, получаемые из животных источников, считаются медикаментами, производимыми по старой технологии. Лекарства считаются относительно невысокого качества из-за недостаточной степени очистки конечного продукта. В начале 20-х годов минувшего столетия инсулин, даже вызывавший сильную аллергию, стал настоящим «фармакологическим чудом», спасавшим жизни инсулинозависимых людей.

Препараты первых выпусков тяжело переносились также из-за наличия проинсулина в составе. Гормональные инъекции особо плохо переносили дети и люди пожилого возраста. Со временем от этой примеси (проинсулина) удалось избавиться методом более тщательной очистки состава. От бычьего инсулина отказались совсем, так как он почти всегда вызвал побочные явления.

Из чего сделан инсулин: важные нюансы

В современных схемах терапевтического воздействия на пациентов используют оба типа инсулина: и животного, и человеческого происхождения. Последние наработки позволяют производить продукты высочайшей степени очистки.

Ранее инсулин мог содержать целый ряд нежелательных примесей:

Ранее такие «добавки» могли вызвать серьезные осложнения, особенно у пациентов, которые вынуждены принимать большие дозы препарата.

Усовершенствованные лекарства лишены нежелательных примесей. Если рассматривать инсулин животного происхождения, лучшим является монопиковый продукт, который производится с выработкой «пика» гормонального вещества.

Длительность фармакологического эффекта

Производство гормональных препаратов налажено сразу в нескольких направлениях. В зависимости от того, как делают инсулин, будет зависеть продолжительность его действия.

Выделяют следующие типы препаратов:

1. С ультракоротким эффектом;
2. Короткого действия;
3. Пролонгированного действия;
4. Средней степени продолжительности;
5. Длительного действия;
6. Комбинированного типа.

Препараты ультракороткого действия

Типичные представители группы: Лизпро и Аспарт. Инсулин в первом варианте производят методом перестановки аминокислотных остатков в гормоне(речь идет о лизине и пролине). Таким образом, в ходе производства минимизируют риск возникновения гексамеров. За счет того, что подобный инсулин быстрее распадается на мономеры, процесс усвоение препарата не сопровождается осложнениями и побочными эффектами.

Аналогичным образом производят и Аспарт. Разница только в том, что аминокислоту пролин заменяют аспарагиновой кислотой. Препарат быстро распадается в организме человека на ряд простых молекул, мгновенно впитывается в кровь.

Препараты короткого действия

Инсулины короткого действия представлены буферными растворами. Они предназначены именно для подкожных инъекций. В ряде случае допускается иной формат введения, но подобные решения может принимать только врач.

Препарат начинает «работать» через 15 – 25 минут. Максимальная концентрация вещества в организме наблюдается спустя 2 – 2,5 час после инъекции.

В целом препарат воздействует на организм пациента около 6 часов. Инсулины данной категории создаются для лечения диабетиков в условиях стационара. Они позволяют быстро вывести человека из состояния острой гипергликемии, диабетической прекомы или комы.

Инсулин средней длительности

Препараты медленно поступают в кровь. Инсулин получают по стандартной схеме, но на конечных этапах производства совершенствуют состав. Чтобы увеличить их гипогликемическое действие, к составу подмешивают специальные пролонгирующие вещества – цинк или протамин. Чаще всего инсулин представлен в виде суспензий.

Инсулин длительного действия

Инсулины пролонгированного действия являются самыми современными фармакологическими продуктами на сегодняшний день. Самый популярный препарат - Гларгин. Производитель никогда не скрывал, из чего делают инсулин человеческий для диабетиков. При помощи ДНК-рекомбинантной технологии удается создавать точный аналог гормона, который синтезирует поджелудочная железа здорового человека.

Чтобы получить итоговый продукт проводят чрезвычайно сложную модификацию молекулы гормона. Заменяют аспарагин глицином, присоединяя аргининовые остатки. Препарат не используют для лечения коматозных или прекоматозных состояний. Его назначают только подкожно.

Роль вспомогательных веществ

Производство любого фармакологического продукта, в частности инсулина, без использования специальных добавок представить себе невозможно.

По своим классам все добавки для инсулинсодержащих препаратов можно условно разделить на следующие категории:

1. Вещества, предопределяющие пролонгацию лекарств;
2. Дезинфицирующие компоненты;
3. Стабилизаторы кислотности.

Пролонгаторы

С целью удлинитель время воздействия на пациента к раствору инсулина подмешивают препараты-пролонгаторы.

Чаще всего используют:

Антимикробные компоненты

Антимикробные составляющие продляют срок пригодности медикаментов. Наличие дезинфицирующих компонентов позволяет не допустить размножения микробов. Эти вещества по своей биохимической природе являются консервантами, не влияющими на активность самого препарата.

Самые популярные антимикробные добавки, используемые в производстве инсулина:

Для каждого конкретного препарата используют свои особые добавки. Их взаимодействие друг с другом в обязательном порядке детально изучают на доклиническом этапе. Главное требование – консервант не должен нарушать биологическую активность препарата.

Качественный и умело подобранный дезинфицирующий препарат позволяет не просто сохранить стерильность состава на протяжении длительного периода, но даже делать внутрикожные или подкожные инъекции, предварительно не обеззараживая дермальное полотно. Это чрезвычайно важно пи возникновении экстремальных ситуаций, когда времени на обработку места для инъекций нет.

Стабилизаторы

В каждом растворе должен быть стабильным рН и не меняться со временем. Стабилизаторы используют, как раз для того, чтобы уберечь лекарство от повышения уровня кислотности.

Для инъекционных растворов чаще всего используют фосфаты. Если инсулин дополнен цинком, стабилизаторы не используют, поскольку сами ионы металла исполняют роль стабилизаторов кислотности раствора.

Как и в случае с антимикробными компонентами, стабилизаторы не должны вступать в какие-либо реакции с самим действующим веществом.

Задача инсулина заключается не только в поддерживании оптимального уровня сахара в крови диабетика, но гормон должен еще и не быть опасным для других органов, тканей человеческого тела.

Что такое калибровка инсулиновых шприцев

В самых первых препаратах с инсулином в 1 мл раствора содержалась всего 1 ЕД. Только со временем концентрацию удалось повысить. На территории РФ распространены флаконы с маркировочными символами - U-40 или 40 ед/мл. Это значит, что в 1 мл раствора сконцентрировано 40 ЕД.

Современные шприцы дополнены четкой продуманной калибровкой, которая позволит ввести необходимую дозу, избежав риска получить неожиданную передозировку. Все нюансы, касательно использования шприцов с калибровкой объясняет лечащий врач, подбирая препарат для диабетика впервые или же в момент коррекции старой схемы лечения.

Из чего делают инсулин (изготовление, производство, получение, синтезирование)

Инсулин является жизненно важным лекарственным препаратом, он произвел настоящую революцию в жизни многих людей, страдающих сахарным диабетом.

Во всей истории медицины и фармации 20 века можно выделить, пожалуй, только одну группу медикаментов, имеющих такую же важность – это антибиотики. Они, равно как и инсулин, очень быстро вошли в медицину и помогли спасти множество человеческих жизней.

День борьбы против сахарного диабета отмечается по инициативе Всемирной Организации Здравоохранения каждый год, начиная с 1991 г в день рождения канадского физиолога Ф.Бантинга, который открыл гормон инсулин вместе с Дж.Дж.Маклеодом. Давайте рассмотрим, как получают делают этот гормон.

Чем отличаются препараты инсулина друг от друга

1. Степень очистки.
2. Источник получения – бывает свиной, бычий, человеческий инсулин.
3. Дополнительные компоненты, входящие в раствор препарата – консерванты, пролонгаторы действия и другие.
4. Концентрация.
5. рН раствора.
6. Возможность смешивания препаратов короткого и продленного действия.

Инсулин представляет собой гормон, который вырабатывается специальными клетками поджелудочной железы. Он является двухцепочечным белком, в состав которого включена 51 аминокислота.

В мире ежегодно употребляется около 6 миллиардов единиц инсулина (1 единица – это 42 мкг вещества). Производство инсулина является высокотехнологичным и осуществляется только промышленными способами.

Источники получения инсулина

В настоящее время в зависимости от источника получения выделяют свиной инсулин и препараты человеческого инсулина.

Свиной инсулин сейчас имеет очень высокую степень очистки, обладает хорошим сахароснижающим эффектом, на него практически не бывает аллергических реакций.

Препараты инсулина человека полностью соответствуют по химическому строению человеческому гормону. Они производятся обычно путем биосинтеза с применением генно-инженерных технологий.

Крупные фирмы производители используют такие методики производства, которые гарантируют соответствие их продукции всем стандартам качества. Больших различий в действии человеческого и свиного монокомпонентного инсулина (то есть высокоочищенного) не выявлено, в отношении иммунной системы, по данным многих исследований, разница минимальна.

Вспомогательные компоненты, используемые при производстве инсулина

Во флаконе с препаратом содержится раствор, содержащий не только сам гормон инсулин, но также и другие соединения. Каждое из них играет свою определенную роль:

• продление действия препарата;
• дезинфекция раствора;
• наличие буферных свойств раствора и поддержание нейтрального рН (кислотно-щелочной баланс).

Продление действия инсулина

Для создания инсулина продленного действия к раствору обычного инсулина добавляют одно из двух соединений – цинк или протамин. В зависимости от этого все инсулины можно разделить на две группы:

• протамин-инсулины – протафан, инсуман базал, НПХ, хумулин Н;
• цинк-инсулины – инсулин-цинк-суспензии моно-тард, ленте, хумулин-цинк.

Протамин представляет собой белок, но побочные реакции в виде аллергии на него бывают очень редко.

Для создания нейтральной среды раствора к нему добавляют фосфатный буфер. При этом нужно помнить, что инсулин, содержащий фосфаты, категорически запрещено соединять с инсулин-цинк-суспензией (ИЦС), так как фосфат цинка при этом выпадает в осадок, и действие цинк-инсулина укорачивается самым непредсказуемым образом.

Дезинфицирующие компоненты

Обеззараживающим действием обладают некоторые из соединений, которые по фармако-технологическим критериям и так должны быть введены в препарат. К ним относятся крезол и фенол (оба они имеют специфический запах), а еще метилпарабензоат (метилпарабен), у которого запах отсутствует.

Введение какого-либо из данных консервантов и обуславливает специфический запах некоторых препаратов инсулина. Все консерванты в количестве, в котором они находятся в препаратах инсулина, не имеют какого-либо негативного влияния.

В протамин-инсулины обычно включают крезол или фенол. В растворы ИЦС фенол добавлять нельзя, потому что он изменяет физические свойства частиц гормона. В данные препараты включают метилпарабен. Также антимикробным действие обладают ионы цинка, находящиеся в растворе.

Благодаря такой многоступенчатой антибактериальной защите с помощью консервантов предотвращается развитие возможных осложнений, причиной которых могло бы стать бактериальное обсеменение при многократном введении иглы во флакон с раствором.

За счет наличия такого механизма защиты пациент может использовать для подкожных инъекций препарата один и тот же шприц в течение 5 – 7 дней (при условии, что шприц использует только он один). Более того, консерванты дают возможность не использовать спирт для обработки кожи перед инъекцией, но опять же только в том случае, если больной делает инъекцию сам себе шприцем с тонкой иглой (инсулиновым).

Калибровка инсулиновых шприцев

В первых препаратах инсулина в одном мл раствора содержалась только дона единица гормона. Позднее концентрацию увеличили. Большая часть препаратов инсулина во флаконах, применяемых в России, содержит в 1 мл раствора 40 ед. Флаконы при этом обычно маркируются символом U-40 или 40 ед/мл.

Инсулиновые шприцы для широкого использования предназначаются, как раз, для такого инсулина и их калибровка произведена по следующему принципу: при наборе шприцем 0,5 мл раствора человек набирает 20 единиц, 0,35 мл соответствует 10 единицам и так далее.

Каждая отметка на шприце равна определенному объему, и больной уже знает, сколько единиц в этом объеме содержится. Таким образом, калибровка шприцев представляет собой градуировку по объему препарата, рассчитанную на применение инсулина U-40. 4 единицы инсулина содержатся в 0,1 мл, 6 единиц – в 0,15 мл препарата и так далее до 40 единиц, которые соответствуют 1 мл раствора.

В некоторых станах применяется инсулин, 1 мл которого содержит 100 единиц (U-100). Для таких препаратов выпускаются специальные инсулиновые шприцы, которые похожи на те, что были рассмотрены выше, но на них нанесена другая калибровка.

Она учитывает именно данную концентрацию (она в 2,5 раза превышает стандартную). При этом доза инсулина для пациента, естественно, остается прежней, так как она удовлетворяет потребность организма в конкретном количестве инсулина.

То есть если ранее больной использовал препарат U-40 и в сутки вводил 40 единиц гормона, то эти же 40 единиц он должен получать и при инъекциях инсулина U-100, но вводить его в количестве в 2,5 раза меньше. То есть те же самые 40 единиц будут содержаться в 0,4 мл раствора.

К сожалению, не все врачи и тем более больные сахарным диабетом об этом знают. Первые сложности начались, когда некоторые из пациентов перешли на использование инъекторов инсулина (шприц-ручки), в которых применяются пенфиллы (специальные картриджи), содержащие инсулин U-40.

Если в такой шприц набрать раствор с маркировкой U-100, к примеру, до отметки 20 единиц (то есть 0,5 мл), то в данном объеме будет содержаться целых 50 единиц препарата.

Каждый раз, наполняя инсулином U-100 обычные шприцы и смотря при этом на отсечки единиц, человек будет набирать дозу в 2,5 раза большую, чем та, которая показана на уровне данной отметки. Если ни врач, ни пациент своевременно не заметят эту ошибку, то высока вероятность развития тяжелой гипогликемии из-за постоянной передозировки препарата, что на практике нередко и происходит.

С другой стороны, иногда встречаются инсулиновые шприцы, откалиброванные именно для препарата U-100. Если такой шприц ошибочно наполнить привычным многим раствором U-40, то доза инсулина в шприце будет в 2,5 раза меньше, чем та, которая написана около соответствующей отметки на шприце.

В результате этого возможно на первый взгляд необъяснимое повышение глюкозы в крови. На самом деле, конечно, все вполне логично – для каждой концентрации препарата необходимо использовать подходящий шприц.

В некоторых странах, например в Швейцарии, был тщательно продуман план, согласно которому был осуществлен грамотный переход на препараты инсулина с маркировкой U-100. Но это требует тесного контакта всех заинтересованных сторон: врачей многих специальностей, пациентов, медсестер из любых отделений, фармацевтов, производителей, органов власти.

В нашей стране очень сложно осуществить переход всех пациентов только на использование инсулина U-100, потому что, скорее всего, это приведет к увеличению количества ошибок при определении дозы.

Совместное применение инсулинов короткого и продленного действия

В современной медицине лечение сахарного диабета, особенно первого типа, обычно происходит с использованием комбинации двух типов инсулина – короткого и пролонгированного действия.

Для пациентов было бы намного удобнее, если бы препараты с разной продолжительностью действия можно было соединять в одном шприце и вводить одновременно, чтобы избежать двойного прокола кожи.

Многие врачи не знают, чем определяется возможность смешивания различных инсулинов. В основе этого лежит химическая и галеновая (определяемая составом) совместимость инсулинов продленного и короткого действия.

Очень важно, чтобы при смешивании двух типов препаратов быстрое начало действия короткого инсулина не растягивалось и не исчезало.

Доказано, что препарат короткого действия можно комбинировать в одной инъекции с протамин-инсулином, при этом начало работы короткого инсулина не откладывается, потому что не происходит связывания растворимого инсулина с протамином.

При этом производитель препарата не имеет никакого значения. Например, инсулин актрапид можно соединять с хумулином Н или протафаном. Более того, смеси этих препаратов можно хранить.

Относительно препаратов цинк-инсулина давно установлено, что инсулин-цинк-суспензию (кристаллическую) нельзя соединять с коротким инсулином, так он связывается с излишком ионов цинка и трансформируется в продленный инсулин, иногда частично.

Некоторые больные сначала вводят препарат короткого действия, потом, не вынимая иглы из-под кожи, немного изменяют ее направление, и вводят через нее же цинк-инсулин.

По такому способу введения проводилось довольно мало научных исследований, поэтому нельзя исключать тот факт, что в некоторых случаях при таком способе инъекции под кожей может образовываться комплекс цинк-инсулина и препарата короткого действия, что приводит к нарушению всасывания последнего.

Поэтому лучше вводить короткий инсулин совершенно отдельно от цинк-инсулина, делать две раздельные инъекции в участки кожи, находящиеся друг от друга на расстоянии не менее 1 см. это не удобно, чего не сказать о стандартном приеме.

Комбинированные инсулины

Сейчас фармацевтической промышленностью выпускаются комбинированные препараты, содержащие инсулин короткого действия вместе с протамин-инсулином в строго определенном процентном соотношении. К таким препаратам относятся:

Наиболее эффективными являются комбинации, в которых соотношение короткого и продленного инсулина составляет 30:70 или 25:75. Это соотношение всегда указывается в инструкции по применению каждого конкретного препарата.

Такие препараты лучше всего подойдут для людей, соблюдающих постоянный режим питания, имеющих регулярную двигательную активность. Например, их часто используют пожилые больные диабетом второго типа.

Комбинированные инсулины не подходят для осуществления так называемой «гибкой» инсулинотерапии, когда возникает необходимость постоянно менять дозировку инсулина короткого действия.

Например, это нужно делать при изменении количества углеводов в продуктах питания, уменьшении или усилении физической активности и т.д. При этом доза базального инсулина (пролонгированного) практически не изменяется.

Сахарный диабет занимает третье место на планете по распространенности. Он отстает только от сердечно-сосудистых болезней и онкологии. По разным данным количество больных диабетом в мире составляет от 120 до 180 миллионов человек (примерно 3% от всех жителей Земли). По некоторым прогнозам каждые 15 лет число больных будет возрастать в два раза.

Чтобы проводить эффективную инсулинотерапию достаточно иметь всего один препарат, инсулин короткого действия, и один пролонгированный инсулин, их разрешено сочетать друг с другом. Также в некоторых случаях (в основном для больных пожилого возраста) возникает необходимость в препарате комбинированного действия.

1. Высокая степень очистки.
2. Возможность смешивания с другими видами инсулина.
3. Нейтральный уровень рН.
4. Препараты из разряда продленных инсулинов должны иметь продолжительность действия от 12 до 18 часов, чтобы достаточно было их вводить 2 раза в сутки.

Содержание:
Введение
Глава 1. Литературный обзор
1.1.Получение инсулина
1.2.Препараты инсулина
1.3. Шприцы, шприц-ручки и дозаторы инсулина
1.4.Техника инъекции инсулина………………………………… ……..
1.5.Факторы, влияющие на всасывание и действие инсулина………..
1.6. Осложнения инсулинотерапии……………………………………. .
1.7. Упаковка инсулина
1.8. Хранение инсулина.
1.9. Современные пути совершенствования инсулинотерапии…..
Глава 2. Экспериментальная часть
Заключение
Литература

Введение:
Инсулин (от лат. insula -- остров) -- гормон пептидной природы, образуется в бета-клетках островков Лангерганса поджелудочной железы. Оказывает многогранное влияние на обмен практически во всех тканях.
Основная функция инсулина - обеспечивать проницаемость клеточных мембран для молекул глюкозы. В упрощенном виде можно сказать, что не только углеводы, но и любые питательные вещества в конечном счете расщепляются до глюкозы, которая и используется для синтеза других содержащих углерод молекул, и является единственным видом топлива для клеточных энергостанций - митохондрий. Без инсулина проницаемость клеточной мембраны для глюкозы падает в 20 раз, и клетки умирают от голода, а растворенный в крови избыток сахара отравляет организм.
Нарушение секреции инсулина вследствие деструкции бета-клеток -- абсолютная недостаточность инсулина -- является ключевым звеном патогенеза сахарного диабета 1-го типа. Нарушение действия инсулина на ткани -- относительная инсулиновая недостаточность -- имеет важное место в развитии сахарного диабета 2-го типа.
Число больных диабетом во всем мире составляет 120 млн. (2,5% населения). Каждые 10-15 лет количество больных удваивается. По оценке Международного института диабета (Австралия), к 2010 году в мире будет 220 млн. больных. В Украине насчитывается около I млн. больных, из которых 10-15% страдает наиболее тяжелым инсулинозависимым диабетом (I типа). В действительности число больных в 2-3 раза больше за счет скрытых недиагностированных форм.
История открытия инсулина связана с именем русского врача И.М. Соболева (вторая половина 19 века), доказавшего, что уровень сахара в крови человека регулируется специальным гормоном поджелудочной железы.
В 1922 году инсулин, выделенный из поджелудочной железы животного, был впервые введен десятилетнему мальчику, больному диабетом. результат превзошел все ожидания, и уже через год американская фирма «Eli Lilly» выпустила первый препарат животного инсулина.

После получения первой промышленной партии инсулина в последующие несколько лет пройден огромный путь его выделения и очистки. В результате гормон стал доступен для больных сахарным диабетом 1 типа.
В 1935 году датский исследователь Хагедорн оптимизировал действие инсулина в организме, предложив пролонгированный препарат.
Первые кристаллы инсулина были получены в 1952 году, а в в1954 году английский биохимик Г.Сенджер расшифровал структуру инсулина. Развитие методов очистки гормона от других гормональных веществ и продуктов деградации инсулина позволили получиь гомогенный инсулин, называемый однокомпонентным.
В начале 70-х г.г. советскими учеными А.Юдаевым и С. Швачкиным был предложен химический синтез инсулина, однако осуществление данного синтеза в промышленном масштабе было дорогостоящим и нерентабельным.
В дальнейшем шло прогрессирующее улучшение степени очистки инсулинов, что уменьшало проблемы, обусловленные инсулиновой аллергией, нарушениями работы почек, расстройством зрения и иммунной резистентностью к инсулину. Был необходим наиболее эффективный гормон для заместительной терапии при сахарном диабете - гомологичный инсулин, то есть инсулин человека.
В 80- годах достижения молекулярной биологии позволили синтезировать с помощью E.coli обе цепи человеческого инсулина, которые были затем соединены в молекулу биологически активного гормона, а в Институте биоорганической химии РАН получен рекомбинантный инсулин с использованием генно-инженерных штаммов E.coli.

Цель моей работы: Изучение препаратов инсулина представленных на нашем рынке, их преимущества и недостатки.
Задачи: Рассмотрение технологического процесса получения инсулина в промышленном производстве.

Глава 1. Литературный обзор
1.1 Получение инсулина
Инсулин человека можно производить четырьмя способами:
1) полным химическим синтезом;
2) экстракцией из поджелудочных желез человека (оба этих способа не подходят из-за неэкономичности: недостаточной разработанности первого способа и недостатка сырья для массового производства вторым способом);
3) полусинтетическим методом с помощью ферментно-химической замены в положении 30 В-цепи аминокислоты аланина в свином инсулине на треонин;
4) биосинтетическим способом по генноинженерной технологии. Два последних метода позволяют получить человеческий инсулин высокой степени очистки.
Рассмотрим получение инсулина биосинтетическим путем, с точки зрения преимущества этого метода.
Итак, преимущества получения инсулина биосинтетическим путем.
До внедрения в промышленность метода получения инсулина с использованием рекомбинантных микроорганизмов существовал только один способ получения инсулина – из поджелудочных желез крупного рогатого скота и свиней. Инсулин, получаемый из поджелудочной железы крупного рогатого скота отличается от инсулина человека на 3 аминокислотных остатка, а инсулин, получаемый из железы свиньи, только на один аминокислотный остаток, то есть он ближе к человеческому инсулину. Тем не менее, при введении белков, отличающихся по структуре от белков человека даже в таком незначительном выражении, возможно возникновение аллергических реакций. Такой инсулин, как чужеродный белок, также может и инактивироваться в крови образующимися антителами.
Кроме того, для получения 1 килограмма инсулина требуется 35 тысяч голов свиней (если известно, что годовая потребность в инсулине -1 тонна препарата). С другой стороны, биосинтетическим путем можно получить такое же количесвто инсулина, проведя биосинтез в 25 кубовом ферментере, используя рекомбинантный микроорганизм Escherichia coli.
Биосинтетический метод получения инсулина стал применяться в начале 80-х годов
(восьмидесятых годов).
Остановимся на схеме получения рекомбинантного инсулина (фирма Eli Lilli- Эли-Лилли, Соединенные Штаты Америки):
1. этап Путем химического синтеза были созданы последовательности нуклеотидов, которые кодируют образование А и В цепей, то есть были созданы синтетические гены.
2. этап. Каждый из синтетических генов вводят в плазмиды (в одну плазмиду вводят ген, синтезирующий цепь А, в другую плазмиду вводят ген, синтезирующий цепь В).
3. этап. Вводят ген, кодирующий образование фермента бетагалактозидазы. Этот ген включают в каждую плазмиду для того, чтобы добиться бурной репликации плазмид.
4. этап. Вводят плазмиды в клетку Escherichia coli – кишечной палочки и получают две культуры продуцента, одна культура синтезирует А-цепь, вторая В-цепь.
5. этап. Помещают две культуры в ферментер. В среду добавляют галактозу, которая индуцирует образование фермента бетагалактозидазы. При этом плазмиды активно реплицируются, образуя много копий плазмид и, следовательно, много генов, синтезирующих А и В цепи.
6. этап. Клетки лизируют, выделяют А и В цепи, которые связаны с бетагалактозидазой. Все это обрабатывают бромцианом и отщепляют А и В-цепи от бетагалактозидазы. Затем производят дальнейшую очистку и выделение А и В цепей.
7. этап. Окисляют остатки цистеина, связывают и получают инсулин.

Инсулин, полученный этим путем является человеческим инсулином по своей структуре, что с самого начала терапии сводит к минимуму возникновение аллергических реакций.
Для получения очищенного инсулина человека выделенный из биомассы гибридный белок подвергают химко-ферментативной трансформации и соответствующей хроматографической очистке (фронтальной, гельпроникающей, анионообменной).
В Институте РАН получен рекомбинантный инсулин с использованием генно-инженерных штаммов E.coli, метод заключается в синтезе его биологического предшественника проинсулина, и позволяющий не проводить раздельного синтеза А и В цепей инсулина. Для выработки проинсулиновой части молекулы в Е.coli. вводят плазмиду (ее получают путем встраивания природной или чужеродной ДНК - так получают рекомбинантную молекулу РНК). Плазмида обеспечивает синтез рекомбинантного белка, представляющего собой лидерную последовательность и фрагмент белка, а также проинсулин человека с находящимися между ними остатком метионина (аминокислота). Проинсулиновую часть молекулы отделяют обработкой бромцианом в уксусной кислоте (расщепление идет избирательно - по остатку метионина). Смесь (проинсулиновая часть и лидерная последовательность) разделяют хроматографически. На следующем этапе в полученной последовательности проинсулина осуществляют правильное взаимное расположение цепей А и В, что выполняет центральная часть - пептид С. На следующем этапе ферментативным способом вычленяют связывающий С пептид. После ряда хроматографических очисток, включающих ионообменные, гелевые и ВЭЖХ, получаю человеческий инсулин высокой чистоты и природной активности.
Контроль качества генноинженерного инсулина предполагает контроль дополнительных показателей, характеризующих стабильность рекомбинантного штамма и плазмиды, отсутствие постороннего генетического материала в препарате, идентичность экспрессируемого гена и др.

1.2 Препараты инсулина
Препараты инсулина различаются по источнику получения. Инсулин свиньи и быка отличается от человеческого по аминокислотному составу: бычий - по трем аминокислотам, а свиной - по одной. Неудивительно, что при лечении бычьим инсулином побочные реакции развиваются гораздо чаще, чем при терапии свиным или человеческим инсулином. Эти реакции выражаются в иммунологической инсулинорезистентности, аллергии к инсулину, липодистрофиях (изменении подкожножировой клетчатки в месте инъекции).
Несмотря на явные недостатки бычьего инсулина, он все еще широко используется в мире. И все же недостатки бычьего инсулина в иммунологическом плане очевидны: его ни в коем случае не рекомендуется назначать больным впервые выявленным сахарным диабетом, беременным или для кратковременной инсулинотерапии, например в периоперационном периоде. Отрицательные качества бычьего инсулина сохраняются и при использовании его в смеси со свиным, поэтому смешанные (свиной+бычий) инсулины также не стоит использовать для терапии указанных категорий больных.
Препараты инсулина человека по химической структуре полностью идентичны человеческому инсулину.
Основной проблемой биосинтетическиго метода получения инсулина человека является полная очистка конечного продукта от малейших примесей использованных микроорганизмов и продуктов их жизнедеятельности. Новые методы контроля качества гарантируют, что биосинтетические инсулины человека вышеперечисленных производителей свободны от каких-либо вредных примесей; таким образом, их степень очистки и сахароснижающая эффективность отвечают самым высоким требованиям и являются практически одинаковыми. Каких-либо нежелательных побочных действий, зависящих от примесей, эти препараты инсулина не имеют.

Препараты инсулина в зависимости от начала и длительности действия делятся на следующие группы:
1) инсулины быстрого и сверхкороткого действия;
2) инсулины короткого действия («простые» инсулины);
3) инсулины средней продолжительности действия («промежуточные» инсулины);
4) инсулины длительного действия;
5) «смешанные» инсулины - комбинация инсулинов разной продолжительности действия.
Количество препаратов инсулина, имеющих разные названия, составляет несколько десятков, и ежегодно добавляются новые названия инсулинов различных зарубежных, а в последние годы и отечественных фармацевтических фирм

Инсулины быстрого и сверхкороткого действия

Инсулины быстрого и сверхкороткого действия включают в настоящее время три новых препарата - лизпро (хумалог), аспарт (ново рапид, новолог) и глюлизин (апидра). Их особенность - в более быстром начале и окончании действия по сравнению с обычными, «простыми» ин-сулинами человека. Быстрое наступление глюкозоснижающего эффекта новых инсулинов обусловлено их ускоренным всасыванием из подкожно-жировой клетчатки. Особенности новых инсулинов позволяют уменьшить промежуток времени между их инъекциями и приемом пищи, снизить уровень послепищевой гликемии и уменьшить частоту возникновения гипогликемии.
Начало действия лизпро, аспарта и глюлизина происходит в диапазоне от 5 до 10-15 минут, максимальный эффект (пик действия) - через 60 минут, продолжительность действия - 3 - 5 часов. Эти инсулины вводят за 5 - 15 минут до еды или непосредственно перед ней. Установлено, что введение инсулина лизпро сразу же после еды также обеспечивает хороший контроль гликемии. Однако важно помнить, что введение этих инсулинов за 20 - 30 минут до еды может приводить к гипогликемии.
Больным, переходящим на введение указанных инсулинов, надо чаще контролировать уровни гликемии, пока они не научатся соотносить количество потребляемых углеводов и дозы инсулина. Таким образом, дозы препаратов устанавливаются в каждом конкретном случае индивидуально.
Если применяются только хумалог (Инсулин лизпро), ново рапид или новолог (инсулин аспарт), или апидра (инсулин глюлизин), то их можно вводить 4 - 6 раз в сутки, а в комбинации с инсулинами продленного действия - 3 раза в сутки. Превышение разовой дозы в 40 Ед допускается в исключительных случаях. Данные инсулины, выпускающиеся во флаконах, можно смешивать в одном шприце с препаратами человеческого инсулина с большей продолжительностью действия. При этом быстродействующий инсулин набирают в шприц первым. Инъекцию желательно сделать сразу же после смешивания. Данные инсулины, выпускающиеся в картриджах (специальных гильзах), не предназначены для приготовления смесей с какими-либо другими инсулинами.

Это важно!
Новые быстродействующие инсулины удобны для больных, ведущих активный образ жизни, их применение рекомендуют при острых инфекциях, эмоциональных стрессах, увеличении количества углеводов в пище, при приеме лекарств, способствующих гипергликемии (гормоны щитовидной железы, кортикостероиды - преднизолон и др.), при непереносимости других препаратов инсулина или при послепищевой гипергликемии, которая плохо поддается действию других инсулинов. Следует еще раз подчеркнуть, что быстродействующие инсулины следует применять в непосредственной связи с приемом пищи.
ХУМАЛОГ® (HUMALOG®)

Аналог человеческого инсулина короткого действия
Действующее вещество «Инсулин лизпро» (Insulin lispro)

Состав и форма выпуска
1 мл раствора для инъекций содержит инсулина лизпро 40 или 100 МЕ; во флаконах по 10 мл и картриджах по 1,5 и 3 мл (только 100 МЕ/мл).

Фармакологическое действие
ДНК-рекомбинантный аналог инсулина человеческого. Отличается от последнего обратной последовательностью аминокислот в положениях 28 и 29 В-цепи инсулина.
Основным действием препарата является регуляция метаболизма глюкозы. Кроме того, он обладает анаболическим действием. В мышечной ткани происходит увеличение содержания гликогена, жирных кислот, глицерола, усиление синтеза белка и увеличение потребления аминокислот, но при этом происходит снижение гликогенолиза, глюконеогенеза, кетогенеза, липолиза, катаболизма белков и высвобождения аминокислот.
Показания
Сахарный диабет I и II типа.
Побочный эффект, связанный с основным действием препарата: гипогликемия
Аллергические реакции: возможны местные аллергические реакции - покраснение, отек или зуд в месте инъекции (обычно исчезают в течение нескольких дней или недель); системные аллергические реакции (возникают реже, но являются более серьезными) - генерализованный зуд, крапивница, ангионевротический отек, лихорадка, одышка, снижение АД, тахикардия, повышенное потоотделение. Тяжелые случаи системных аллергических реакций могут быть угрожающими для жизни.
Местные реакции: липодистрофия в месте инъекции.
Противопоказания к применению:

Гипогликемия;
- повышенная чувствительность к компонентам препарата.
К настоящему времени не выявлено какого-либо нежелательного действия инсулина лизпро на беременность или состояние здоровья плода/новорожденного.
Условия отпуска из аптек

Препарат отпускается по рецепту.
Условия и сроки хранения

Список Б. Препарат следует хранить в недоступном для детей месте, в холодильнике, при температуре от 2° до 8°C; не замораживать. Срок годности - 2 года.
Находящийся в употреблении препарат следует хранить при комнатной температуре от 15° до 25°C; предохранять от прямых солнечных лучей и нагревания. Срок годности - не более 28 дней.

Инсулины короткого действия

Инсулины короткого действия применяются для комбинированной терапии вместе (но не обязательно в одно и то же время) с инсулинами средней продолжительности и длительного действия, а также для лечения сахарного диабета в особых ситуациях - кетоацидозе, инфекциях с высокой температурой тела, операциях, травмах и т. д. Эти инсулины в зависимости от плана лечения могут вводиться от 1-2 до 4 - 6 раз в сутки. Начало действия введенного «простого» инсулина через 15 - 60 минут, максимальный эффект (пик действия) - через 1,5 - 4 часа, длительность действия зависит от величины дозы: при малых дозах (4 - 6 Ед) - в течение 4 - 5 часов, при больших дозах (16 -20 Ед) - до 6 -8 часов.
Примеры препаратов человеческого инсулина короткого действия: akmpanug НМ, берлинсулин Н нормаль 1-40 (в 1 мл 40 Ед), берлинсулин Н нормаль пен (в 1 мл 100 Ед; «пен» - инъекционное устройство), инсуман рапид ЧМ, хумулин регуляр, биосулин Р.
Примеры препаратов свиного инсулина (монокомпонентного, т. е. высокоочищенного) короткого действия: инсулин максирапид ВО-С, моносуинсулин МС.

Берлинсулин Н Нормаль U-40
(Berlinsulin H Normal U-40)

Действующее вещество
«Инсулин растворимый [человеческий полусинтетический]» (Insulin soluble *)

Состав и форма выпуска
1 мл раствора для инъекций содержит инсулина человеческого 40 ЕД; во флаконах по 10 мл, в коробке 1 шт.
Фармакологическое действие - гипогликемическое. Взаимодействует со специфическим рецептором плазматической мембраны и проникает в клетку, где активирует фосфорилирование белков, стимулирует гликогенсинтетазу, пируватдегидрогеназу, гексокиназу, ингибирует липазу жировой ткани и липопротеинлипазу. В комплексе со специфическим рецептором облегчает проникновение глюкозы в клетки, усиливает усвоение и способствует ее превращению в гликоген. Повышает запас гликогена в мышцах, стимулирует синтез пептидов.
Показания
Сахарный диабет I и II типа (все формы), диабетическая кома.
Противопоказания
Гиперчувствительность (относительное противопоказание), гипогликемия.
Побочные действия
Гипогликемия, липодистрофии и покраснение кожи в месте введения, аллергические реакции.
Способ применения и дозы
Дозировка устанавливается индивидуально. Обычно вводят п/к (в особых случаях - в/м) за 10–15 мин до приема пищи 3–4 раза в день. Разовая доза составляет 6–20 ЕД. У больных сахарным диабетом с повышенной чувствительностью к инсулину и у детей эту дозу снижают, у пациентов с незначительной чувствительностью к инсулину - повышают. При диабетической коме сначала Берлинсулин Н Нормаль U?40 вводят в/в в дозе из расчета 0,1–0,3 ЕД/кг, затем длительное в/в вливание из расчета 0,1–0,2 ЕД/кг в час.
Срок годности 2 года
Условия хранения
Список Б.: В прохладном месте, при температуре 2–8 °C (не замораживать).

Инсулины средней продолжительности действия

Инсулины средней продолжительности действия применяются как базовые (базальные) и вводятся 1-2 раза в сутки. Эти инсулины всасываются из мест инъекции относительно медленно, в связи с чем их глюкозоснижающий эффект начинается через 1,5 - 2 часа. Используются препараты инсулина на нейтральном протамине Хагедорна, сокращенно обозначаемые «НПХ». В отличие от инсулин-цинксуспензин НПХ-инсулин содержит белок протамин и сам инсулин в равных (изофанных) количествах, при которых нет избытка ни инсулина, ни протамина (изофан-инсулин). Это позволяет смешивать НПХ-инсулин с инсулином короткого действия в любых соотношениях без изменения их эффекта.
При введении инсулинов этой группы максимальный эффект возникает через 6-10 часов, а общая длительность действия зависит от величины их дозы: от 12 - 14 часов при введении 8 - 12 Ед, и до 16 - 18 часов - при введении больших доз (более 20 - 25 Ед).
Примеры препаратов человеческого инсулина средней продолжительности действия: берлинсулин-Н базал 1-40, инсуман базал, протофан НМ, биосулин Н, хумулин НРХ, хомофан 100. Новый Российский препарат, основанный на суспензии инсулина и протамина, называется бринсулми-ди ЧСП.

Протафан HM (Protaphane HM)

Действующее вещество
Инсулин-изофан [человеческий генно-инженерный](Insulin- isophan )
Состав и форма выпуска
1 мл суспензии для инъекций содержит биосинтетического инсулина человеческого 100 МЕ; в картриджах Пенфилл 3 мл для использования с инсулиновыми шприц-ручками НовоПен 3, НовоПен 3 Деми и Инново и иглами НовоФайн; в блистерной упаковке 5 шт., в коробке 1 упаковка.
Характеристика
Монокомпонентный биосинтетический человеческий изофан-инсулин суспензия средней продолжительности действия.
Фармакологическое действие
Фармакологическое действие - гипогликемическое. Взаимодействует со специфическим рецептором плазматической мембраны и проникает в клетку, где активирует фосфорилирование клеточных белков, стимулирует гликогенсинтетазу, пируватдегидрогеназу, гексокиназу, ингибирует липазу жировой ткани и липопротеинлипазу. В комплексе со специфическим рецептором облегчает проникновение глюкозы в клетки, усиливает ее усвоение тканями и способствует превращению в гликоген. Повышает запас гликогена в мышцах, стимулирует синтез пептидов.
Показания
Сахарный диабет I типа, сахарный диабет II типа (при резистентности к производным сульфонилмочевины, интеркуррентных заболеваниях, операциях и в постоперационном периоде, при беременности).
Противопоказания
Гипогликемия, инсулинома.
Побочные действия
Гипогликемические состояния, аллергические реакции, липодистрофия (при длительном применении).
Срок годности
2,5 года
Условия хранения
Список Б.: В защищенном от света месте, при температуре 2–8 °C (не замораживать). Нельзя подвергать действию солнечного света. Используемый флакон можно хранить при комнатной температуре (не выше 25 °C) в течение 6 нед.

Инсулины длительного действия

Инсулины длительного действия применяют как базовые (базальные) инсулины, их вводят 1, редко 2 раза в сутки. Начало действия через 3 - 4 часа, максимальный эффект через 8-10 часов, продолжительность действия при малых дозах (8-10 Ед) - 14-16 часов, при больших дозах (20 Ед и более) - 24 часа. При инъекциях инсулинов длительного действия в дозах более 0,6 Ед на 1 кг массы тела в сутки препараты следует вводить в виде 2 - 3 инъекций в разные места тела больного.
Примеры препаратов человеческого инсулина длительного действия: хумулин У, ультратард НМ, инсуман базал ГТ, ультраленте.
Инсуман Базал ГТ (Insuman Basal GT)

Действующее вещество
Инсулин-изофан [человеческий генно-инженерный] (Insulin-isophan )
Состав и форма выпуска
1 мл нейтральной суспензии для инъекций Инсумана Базал содержит человеческого инсулина (100% кристаллического протамин инсулина) 40 или 100 МЕ; во флаконах по 10 или 5 мл соответственно, в картонной пачке 5 шт.
1 картридж для шприц-ручки OptiPen (Инсуман Базал 100 для ОптиПена) содержит 3 мл нейтральной суспензии человеческого инсулина (100% кристаллического протамин инсулина) с активностью 100 МЕ/мл; в картонной пачке 5 шт.
Характеристика
Идентичен по структуре инсулину человека и получен методом генной инженерии.
Фармакологическое действие - гипогликемическое.
Фармакодинамика
Понижает уровень глюкозы в крови, повышает ее усвоение тканями, усиливает липогенез и гликогенолиз, синтез белка, снижает скорость продукции глюкозы печенью.
Показания
Сахарный диабет 1 типа у больных, ранее не получавших инсулин, беременных; в случае непереносимости др. инсулинсодержащих препаратов; лабильная форма сахарного диабета на фоне высокого титра антител к инсулину, трансплантация островковых клеток поджелудочной железы. Сахарный диабет 2 типа при резистентности к пероральным сахаропонижающим средствам, во время проведения хирургических операций, при присоединении сопутствующих заболеваний, при неэффективности диетотерапии в период беременности.
Противопоказания
Гиперчувствительность, гипогликемия.
Побочные действия
Связаны с влиянием на углеводный обмен: гипогликемия (бледность, потливость, ощущение сердцебиения, расстройства сна, тремор); неврологические нарушения (редко). Местные реакции: липодистрофия в месте введения (при длительном применении). Аллергические реакции.
Лечение: глюкоза внутрь (если больной в сознании). В случае потери сознания вводят в/в глюкозу или глюкагон в/м (п/к).
Способ применения и дозы
П/к, за 45–60 мин до приема пищи. Место инъекции каждый раз меняют. Доза устанавливается индивидуально: взрослым, впервые получающим препарат, начинают с дозы 8–24 МЕ 1 раз в сутки (больным с высокой чувствительностью к инсулину может оказаться достаточным 8 МЕ/сут, с пониженной - более 24 МЕ/сут). Максимальная разовая доза - 40 МЕ (превышение этой дозы допускается лишь в исключительных случаях).
Меры предосторожности
Абсолютно недопустимо в/в введение. При замене инсулинов животного происхождения на Инсуман Базал может потребоваться снижение дозы.
Срок годности
2 года
Условия хранения
Список Б.: При температуре 2–8 °C (не замораживать).

В последние годы созданы аналоги инсулинов длительного действия гларгин и детемир, которые широко внедряются в практику. Сравнительно с обычными инсулинами длительного действия эти инсулины характеризуются ровным глюкозоснижающим эффектом в течение суток без максимума (пика) действия, более значительным снижением уровня глюкозы в крови натощак, редким возникновением ночной гипогликемии. Увеличенная продолжительность действия инсулина гларгина или детемира напрямую обусловлена низкой скоростью их абсорбции (всасывания) из места подкожного введения в плечо, бедро или живот. Места для инъекций должны чередоваться при каждом новом введении препарата. Эти новые препараты, вводимые 1 раз в сутки применительно к гларгину или 1-2 раза в сутки применительно к детемиру, имеют хорошие перспективы в инсулинотерапии.
Из указанных инсулинов наибольшее распространение уже получил гларгин под фирменным названием «лантус», в 1 мл которого содержится 100 Ед инсулина гларгина. Лантус выпускается в картриджах (гильзах) по 3 мл, флаконах по 10 мл и шприц-ручках «Опти Сет» по 3 мл. Лантус начинает действовать, в среднем, через 1 ч после подкожного введения. Средняя продолжительность действия - 24 ч, максимальная - 29 ч. Однако характер воздействия лантуса на гликемию в течение времени действия препарата может существенно изменяться как у разных больных, так и у одного и того же больного.
При сахарном диабете 1-го типа лантус применяется в качестве основного инсулина. При диабете 2-го типа лантус можно применять как в качестве единственного метода специфического лечения, так и в сочетании с другими препаратами, нормализующими уровень глюкозы в крови.

Смешанные (комбинированные) инсулины

Смешанные (комбинированные) инсулины - это готовые смеси инсулинов разной длительности действия. Они применяются главным образом для инсулинотерапии сахарного диабета 2-го типа и при традиционной (неинтенсивной) инсулинотерапии диабета 1-го типа.
Смешанные инсулины выпускают под названием инсулин Л, берлинсулин Н, инсуман комб 25 ГТ, микстард 30 НМ, хумулин М 3 и др. В этих инсулинах указано процентное соотношение двух человеческих инсулинов короткого и средней продолжительности действия, последний на основе изофан-инсулина (см. выше). Так, инсуман комб выпускается с обозначением 15/85, 25/75 и 50/50. Это означает, например, что во флаконе инсуман комб 25/75, содержащем в 1 мл 40 Ед инсулина, имеется 10 Ед инсулина короткого действия (25% от 40 Ед) и 30 Ед (75% от 40 Ед) инсулина средней длительности действия.
Начало действия комбинированных инсулинов - примерно через 30 минут после введения, общая длительность действия 14-16 часов. Максимальный глюкозоснижаю-щий эффект (пик) зависит от процентного соотношения инсулинов: чем больше «простого» инсулина, тем раньше возникает пик действия. Так, для инсулинов 10/90 и 40/ 60 (соответственно 10 и 40% инсулина короткого действия) максимум действия наступает, соответственно, через 4 - 6 и 2,5-3 часа. Инсулины 10/90, 15/85, 25/75 вводят за 30 - 45 минут до еды, а инсулин 50/50 - за 20 - 30 минут до еды. Отметим, что указанная продолжительность действия готовых смесей инсулинов приблизительна; она зависит и от дозы, и от индивидуальных особенностей человека.
Созданы готовые смеси быстродействующего аналога инсулина лизпро (хумалога) и инсулина средней продолжительности действия - хумулина НПХ в соотношениях 75/25 (75% и 25%) и 50/50, т. е. по 50%. Препараты вводятся за 5- 15 минут до еды 2 раза в день и обеспечивают хороший контроль гликемии. Желательно их введение с помощью шприц-ручки «Хума Пен Эрго».
Обратите внимание!
Для больных сахарным диабетом 1-го типа предпочтительней использовать при традиционной (не интенсивной) инсулинотерапии смешанные инсулины с большим содержанием инсулина короткого действия, при этом достаточно делать 2 инъекции в день.
Для больных диабетом 2-го типа оптимальны препараты с малым содержанием инсулина короткого действия, например, 10-30% «простого» инсулина и 90-70% инсулина средней продолжительности действия.

К новейшим смешанным (комбинированным) инсулинам относится ново-микс 30 пенфилл, в 1 мл которого 100 Ед инсулина, в том числе 30% инсулина acnapm растворимый и 70% инсулина acnapm протамин кристаллический. Входящий в состав ново-микс 30 растворимый инсулин аспарт начинает действовать быстрее по сравнению с обычным растворимым человеческим инсулином, а кристаллический инсулин аспарт протамин обладает средней продолжительностью действия. После подкожного введения препарата эффект развивается через 10 - 20 мин, максимальный эффект - через 1 - 4 ч после инъекции. Продолжительность действия составляет 24 ч. Новомикс 30, называемый двухфазным инсулином аспарт, следует вводить непосредственно перед едой, при необходимости - сразу после приема пищи. Дозу устанавливают индивидуально на основании показателей уровня глюкозы в крови. Средняя суточная доза колеблется от 0,5 до 1 Ед на 1 кг массы тела.
Ново-микс 30 эффективнее снижает повышенный уровень глюкозы в крови после еды с уменьшением риска развития гипогликемии по сравнению со смесью человеческого инсулина 30/70. Кроме того, этот препарат представляет широкие возможности для сочетания с приемом глюкозоснижающих таблеток. Так, одна инъекция ново-микс 30 перед ужином в сочетании с метформином обеспечивает эффективный контроль уровня гликемии при сахарном диабете 2-го типа.
Ново-микс 30 не рекомендуют применять больным до 18 лет в связи с отсутствием клинических данных о безопасности и эффективности препарата у этой возрастной категории. Несмотря на ограниченный опыт применения инсулина аспарт при беременности, использование ново-микс 30 у беременных женщин и кормящих грудью матерей с сахарным диабетом признано допустимым.
Установлены правила применения ново-микс 30 пенфилл, который выпускается в картриджах (гильзах) по 3 мл. Вводимый препарат должен быть комнатной температуры. Инъекции производят подкожно в область бедра или живота, при желании - в область плеча или ягодиц. Места инъекций в пределах выбранной области следует менять для предупреждения развития липодистрофии.
Картриджи ново-микс 30 пенфилл разработаны для использования с инъекционными системами для введения инсулина компании «Ново Нордиск» и иглами «Ново файн». Картриджи должны использоваться только в сочетании с теми средствами для введения инсулина, которые совместимы с ними и позволяют картриджу работать эффективно и безопасно. Картриджи необходимо тщательно проверять. Нельзя использовать инсулин, если в нем после перемешивания имеются хлопья, если ко дну или стенкам прилипли твердые белые частицы, создающие эффект морозного узора. Картриджи ново-микс 30 пенфилл не предназначены для повторного заполнения. Если одновременно применяются препарат ново-микс 30 пенфилл и другой инсулин в картридже пенфилл, то надо использовать две инъекционные системы для введения инсулина - по одной на каждый его тип. После каждой инъекции следует снимать иглу из-за вероятности вытекания жидкости из картриджа вследствие колебания температур, что может привести к изменению концентрации инсулина.

При расчете дозы инсулина исходят из следующих главных факторов:
1) уровень глюкозы в крови и моче;
2) время суток;
3) количество углеводов, которое предполагается съесть во время следующего за инъекцией приема пищи;
4) физическая активность до и после еды. Указанные факторы обозначены как главные, поскольку
они в наибольшей степени определяют расчет дозы инсулина и имеют место у каждого больного сахарным диабетом. Однако известно немало дополнительных факторов, влияющих на потребность в инсулине, которые необходимо учитывать для расчета дозы инсулина у отдельных больных.

1.3. Шприцы, шприц-ручки и дозаторы инсулина:
Традиционно для инъекций применяют инсулиновые шприцы, в настоящее время - пластиковые. Используемый в России стандартный шприц пока рассчитан на 1 мл инсулина с концентрацией 40 Ед. Маркировка на корпусе шприца нанесена в инсулиновых единицах как на обычной линейке с цифрами 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, а также с единичным шагом - делениями между указанными цифрами, соответствующим 1 Ед. Зарубежные инсулиновые шприцы могут быть объемом 0,3, 0,5 и 2 мл и с концентрацией, главным образом, 100 Ед, реже 40 Ед. В России предстоит переход на шприцы, рассчитанные по международному стандарту на 100 Ед. Для инъекций лучше использовать шприцы с приваренными (несъемными) иглами. При соблюдении правил гигиены пластиковые инсулиновые шприцы можно использовать повторно 2 - 3 дня: достаточно закрыть иглу колпачком и хранить в таком виде без стерилизационных мероприятий. Однако после 4 - 5 инъекций из-за притупления иглы введение инсулина становится болезненным. Поэтому при интенсивной инсулинотерапии одноразовые шприцы будут соответствовать названию «одноразовые».
Перед инъекцией желательно протереть резиновую пробку флакона с инсулином ваткой, смоченной в 70%-ном спирте. Флаконы с инсулином короткого действия, а также с аналогами инсулина длительного действия [гларгин, детемир), не надо взбалтывать. Обычные инсулины замедленного действия - это суспензии, то есть во флаконе образуется осадок, и перед набором инсулина его нужно хорошо взболтать.
При наборе инсулина в шприц надо оттянуть поршень шприца до отметки, указывающей на нужное количество единиц инсулина, затем проткнуть иглой резиновую пробку флакона с инсулином, надавить на поршень и впустить воздух во флакон. Далее шприц с флаконом переворачивают вверх дном, держа их в одной руке на уровне глаз, оттягивают поршень вниз до отметки, чуть превышающей дозу инсулина. Прокалывать пробку флакона лучше в самом ее центре толстой иглой для обычных шприцев, а в дальнейшем вводить иглу инсулиновОго шприца в этот прокол. Если в набранный шприц попали пузырьки воздуха, следует пощелкать пальцами по шприцу и осторожно продвинуть поршень до отметки нужной дозы.
Применение смеси разных видов инсулина при правильно подобранных дозах обеспечивает более ровное воздействие на уровень глюкозы в крови, чем отдельное введение тех же инсулинов в тех же дозах. Однако при смешивании разных инсулинов возможны их физико-химические изменения, которые отражаются на действии инсулинов.
Правила смешивания разных инсулинов в шприце:
первым в шприц набирается инсулин короткого действия, вторым - средней продолжительности действия;
инсулин короткого действия и НПХ-инсулин средней продолжительности действия (изофан-инсулин) после смешивания может быть использован сразу же и храниться для последующего введения;
инсулин короткого действия нельзя смешивать с инсулином, содержащим цинк-суспензию, так как избыток цинка частично превращает инсулин короткого действия в инсулин средней продолжительности действия. Поэтому инсулин короткого действия и цинк-инсулин вводят раздельно в виде двух инъекций в участки кожи, отстоящие друг от друга не менее, чем на 1 см;
при смешивании быстрых (лизпро, аспарт) и длительно действующих инсулинов начало действия быстрого инсулина не замедляется. Замедление возможно, хотя и не всегда, при смешивании быстрого инсулина с НПХ-инсу-лином. Смесь быстрого инсулина с инсулинами средней или длительной продолжительности действия вводят за 15 мин до еды;
НПХ-инсулин средней продолжительности действия нельзя смешивать с инсулином длительного действия, содержащим цинк-суспензию. Последний, в результате химического взаимодействия, может перейти в инсулин короткого действия с непредсказуемым эффектом после введения;
длительно действующие аналоги инсулина гларгин и детемир нельзя смешивать с другими инсулинами.
Шприц-ручки состоят из гильзы (патрона, картриджа) для инсулина, корпуса, механизма автоматического срабатывания поршня, иглы, надеваемой на кончик гильзы, торчащей из ручки (после инъекции игла снимается), колпачка для ручки в нерабочем состоянии и футляра, похожего на футляр чернильной авторучки. В шприц-ручке имеется кнопка спуска и механизм, позволяющий установить дозу инсулина с точностью 0,5 и 1 Ед.
Преимуществом шприц-ручки является объединение шприца и емкости инсулина и менее трудоемкая процедура инъекций, чем обычным шприцем. Иголки шприц-ручки более короткие, поэтому инъекции делают под углом 75 - 90°. Иглы настолько тонкие, что вызывают очень незначительные болезненные ощущения. Шприц-ручки можно носить в кармане или сумке, они удобны для активных людей, а также для больных с ослабленным зрением - доза устанавливается по щелчкам механизма: 1 щелчок равен 0,5 или 1 Ед.
Выпускают много типов шприцев-ручек («Хумапен», «Пливапен», «Оптипен» и др.), имеющих обычно инструкции на русском языке. В качестве примера рассмотрим шприц-ручку «Ново Пен 3», которая позволяет:
- дозировать с шагом набора в 1 Ед;
- реже менять гильзу благодаря ее большому объему (300 Ед);
- дозировать с высокой точностью;
- делать инъекции быстро и незаметно;
- точно выполнять назначения врача;
- использовать полный набор инсулинов, включая 5 готовых смесей.
В шприц-ручке «Ново Пен 3» имеется «окно» с широким обзором и шкала, позволяющие больному контролировать количество оставшегося инсулина и однородность суспензии. В системе «Ново Пен 3» применяются гильзы объемом 3 мл, заправленные как инсулином протофан, так и готовыми смесями инсулинов широкого спектра действия, имеющими цветную маркировку для более быстрого распознавания. Замена гильзы занимает несколько секунд.
Шприц-ручка «Ново Пен 3 Деми» обладает всеми достоинствами шприц-ручки «Ново Пен 3», но предназначена специально для тех, кто нуждается в малых дозах инсулина и тонкой их корректировке. Эта шприц-ручка с минимально вводимой дозой инсулина в 1 Ед и шагом набора в 0,5 Ед. Шприц-ручка «Ново Пен 3 Пен Мэйт» рекомендуется для тех, кто боится уколов даже самыми тонкими иглами. В ней игла, спрятанная в корпусе устройства, автоматически вводится в подкожно-жировую клетчатку после нажатия на кнопку, причем это введение происходит мгновенно и практически незаметно для больного. В результате ежедневное многократное введение инсулина становится психологически менее обременительным.
Во многих странах шприц-ручки очень популярны. Для больных сахарным диабетом в России шприц-ручки имеют недостатки: они дороги, не подлежат ремонту при поломке, снабжение пенфилльным инсулином для гильз организовано хуже, чем инсулином во флаконах.
Инсулиновой помпы Удобным методом интенсивной инсулинотерапии является применение дозаторов инсулина («инсулиновой помпы») с непрерывным подкожным введением инсулина. В США более 200 тысяч больных сахарным диабетом используют дозаторы инсулина вместо инъекций шприцем или шприц-ручкой.
С помощью дозаторов инсулина его подача в организм происходит посредством катетера, установленного подкожно и соединенного с резервуаром инсулина и блоком памяти. Последний содержит информацию о количестве инсулина, который нужно ввести. Размер дозатора небольшой - примерно с сигаретную пачку.
В дозаторах используются инсулины сверхкороткого и короткого действия. У дозаторов есть два режима введения инсулина: непрерывная подача в микродозах (базаль-ная скорость), а также определяемая и программируемая самим больным скорость. Первый режим воспроизводит фоновую секрецию инсулина и заменяет введение инсулинов средней продолжительности действия. Второй режим вводится больным во время еды (с учетом количества потребляемых углеводов) или при высоком уровне глюкозы в крови и заменяет инсулин короткого действия при обычной инсулинотерапии. Концентрацию глюкозы в крови дозатор не измеряет и необходимую дозу инсулина не рассчитывает. Это должен осуществлять сам больной, он же заменяет каждые 2-3 дня введенный подкожно катетер. Современные дозаторы (например, реализуемая в России модель 508 R) имеют систему сигнализации и при неполадках в работе сообщают о них больному звуковыми сигналами или вибрацией.
Преимущества использования дозаторов инсулина перед инсулинотерапией посредством многократных инъекций заключаются в следующем:
- использование только инсулина короткого действия и поступление его в микродозах предотвращает депонирование инсулина в подкожной клетчатке, что обеспечивает лучшее всасывание препарата и снижает риск гипогликемии при «выбросах» инсулина из искусственно созданного депо;
- дозатор программирует различные базальные (фоновые) скорости введения инсулина в зависимости от времени суток; это важно для пациентов с явлениями утренней гипогликемии;
- введение малых доз инсулина (в зависимости от дозатора шаг 0,05 - 0,1 Ед) удобно для лиц с очень низкой потребностью в инсулине;
- непрерывное базальное введение инсулина и возможность его дополнительного введения путем нажатия комбинации кнопок на дозаторе позволяет больному вести более свободный образ жизни, не зависеть от времени проведения инъекций инсулина, основных приемов пищи, перекусов, то есть повышает качество жизни.
Улучшение контроля углеводного обмена при применении дозаторов инсулина больными сахарным диабетом 1-го типа доказано многими исследованиями. По данным Эндокринологического научного центра Российской академии медицинских наук (2006), применение дозаторов инсулина в виде инсулиновой помпы позволяет более эффективно компенсировать диабет 1-го типа с выраженным снижением уровня гликированного гемоголобина, а также способствует улучшению качества жизни больных. Инсулинотерапия посредством дозаторов при сахарном диабете 2-го типа менее распространена.
Несмотря на ряд преимуществ дозаторов инсулина в обеспечении компенсации сахарного диабета, этот метод имеет свои недостатки:
- определенные технические сложности при работе дозатора инсулина ограничивают круг больных, которые могут им самостоятельно пользоваться;
- дозаторы инсулина могут применять только хорошо обученные и дисциплинированные больные, так как этот вид инсулинотерапии требует более частого контроля уровня глюкозы в крови - на начальном этапе, при подборе базальных скоростей, 6-10 раз в сутки;
- больной, использующий дозатор инсулина, должен постоянно иметь под рукой сменную систему (резервуар и катетер), инсулин, а также инсулиновый шприц или шприц-ручку;
- высокая стоимость дозаторов инсулина ограничивает пока возможности их более широкого применения. Например, стоимость поступившей в продажу в 2007 г. инсулиновой помпы «DANA Diabetcare II S» с функцией автонастройки дозы инсулина составляет 3300 евро.
Инсулиновые инъекторы
Инсулиновые инъекторы подходят людям, боящимся уколов. Напоминая ручки, они как бы впрыскивают небольшую дозу инсулина под кожу посредством давления.
В июле 2000 года Equidyne выпустил компактный инъектор Injex 30. При помощи струи, обладающей большой скоростью, инсулин вводится под кожу.
Грубые подсчеты показали, что в США 50000 человек используют инсулиновые инъекторы. Хотя более старые модели тяжелы и громоздки для использования и примерно одна из десяти инъекций бывает действительно болезненной.
Хотя инъекторы и причиняют боль, многие люди предпочитают использовать безигольчатые средства введения инсулина. Выбор средства введения инсулина в основном зависит от индивидуальных нужд и образа жизни.
И если вы действительно боитесь уколов, то инсулиновые инъекторы как раз для вас. Если же вас больше беспокоит удобство введения инсулина или вам часто приходится делать инъекции в дороге, то вам, скорее всего, подойдет шприц-ручка.
Некоторые компании являются постоянными производителями инсулиновых инъ
и т.д.................

Производство инсулина – сложный процесс, основным компонентом является:

• Сырье животного происхождения. Получение необходимых компонентов осуществляется в результате обработки поджелудочной железы КРС и свиней. В бычьем имеется три «ненужных» аминокислоты, которые по структуре отличаются от человеческой. Именно поэтому могут провоцировать развитие стойкой аллергии. Свиной гормон поджелудочной железы отличается лишь 1 аминокислотой в сравнении со структурой человеческого, поэтому считается более безопасным. Чем лучше будет очищен биологический продукт, тем меньше вызовет негативных реакций.
• Человеческие ресурсы. Лекарство из этой группы изготовляется по очень сложным технологиям. Некоторые фармацевтические концерны нашли способ изготовления инсулина с использованием специфических бактерий. Также довольно распространенными являются способы ферментативной трансформации с целью изготовления полусинтетических гормональных средств. Существует и другая технология, которая подразумевает применение инновационного метода в генной инженерии, его результатом является получения особых ДНК-рекомбинантных составов с инсулином.

Как получали препараты на основе инсулина

Не каждому пациенту известно, как именно получают инсулин, в этом процессе важное значение имеет тип самого сырья и степень его очистки. Средства, которые получены из продуктов животного происхождения, на сегодняшний день считаются устаревшими, так как изготавливаются по старой технологии. Эти медикаменты не отличаются высоким качеством, так как компоненты не проходят глубокую очистку.

Первые инсулиносодержащие лекарства довольно плохо переносились, так как в них содержался проинсулин. Инъекции таким гормональным средством провоцировали различные побочные реакции у больных детей, а также престарелых пациентов. Позднее, благодаря усовершенствованию технологий очистки, удалось удалить проинсулин из раствора. От применения бычьего инсулина пришлось полностью отказаться в связи развитием обширной побочной симптоматики.

На сегодняшний день усовершенствованные препараты не содержат нежелательных примесей. Среди лекарств животного происхождения одним из лучших считается монопиковый продукт, он изготавливается с выработкой так называемого «пика» гормонального вещества.

Роль вспомогательных веществ

Изготовление любого фармацевтического средства не проходит без использования вспомогательных веществ.

• Компоненты с дезинфицирующими свойствами
• Составляющие, которые обеспечивают пролонгацию воздействия
• Вещества, которые позволяют стабилизировать кислотность раствора.

Благодаря использованию дополнительных компонентов удается улучшить химические характеристики лекарства и достичь высокого уровня очистки.

Стоит отметить, что инсулиновая терапия с применением современных препаратов проходит без серьезных осложнений. Выбрать необходимое лекарство и оптимальную схему применения поможет лечащий врач. Возможно, в дальнейшем потребуется перейти на применение другого препарата в связи с проявлением побочных реакций.